沉默乙酰肝素酶基因对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭能力的影响

目的观察沉默乙酰肝素酶(heparanase，HPA)基因对人卵巢癌SKOV3细胞的增殖及侵袭能力的影响。？方法？构建针对HPA基因的shRNA慢病毒载体，感染人卵巢癌SKOV3细胞。实验设计分为未转染组、实验转染组(选择3个靶点设计HPA-shRNA-1、HPA-shRNA-2、HPA-shRNA-3序列)、空白转染组；转染后，采用荧光定量PCR、Westernblot方法检测HPA在基因水平和转录后蛋白水平的沉默效率；使用流式细胞仪检测细胞周期变化，CCK-8法检测细胞增殖情况，基质凝胶侵袭实验检测细胞侵袭能力变化。结果①构建的shRNA慢病毒载体感染卵巢癌SKOV3细胞后，见HPA-shRNA-1和HPA-shRNA-2序列的HPA基因和蛋白水平均显著下降(P<0.05)，而HPA-shRNA-3序列在其表达上无降低，为无效转染序列；②实验转染组中有效转染序列HPA-shRNA-1、HPA-shRNA-2组中均见细胞G1期比例增加[分别为（69.69±3.87）%、（66.29±4.06）%]，细胞增殖受到抑制[分别为（1.77±0.13）、（1.74±0.27）]，穿膜细胞数显著减少[分别为（22.40±5.02）、（23.42±5.72）]，与未转染组及空白转染组之间相比有明显差异（P<0.05）。结论干扰HPA基因后，对卵巢癌细胞的增殖及侵袭能力有明显的抑制作用，其作用机制与HPA的基因和蛋白表达下调有关。