熊果酸对瘦素诱导的肝星状细胞JAK2-STAT3活化及活性氧产生的影响

目的研究熊果酸对瘦素诱导肝星状细胞（hepaticstellatecells,HSC）JAK2-STAT3信号通路活化、活性氧（ROS）产生及基质金属蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）、基质金属蛋白酶1（MMP-1）mRNA表达的影响。方法以重组大鼠瘦素作用于HSC-T6细胞，干预组在瘦素作用前分别加入熊果酸、N-乙酰-L半胱氨酸(NAC)、氯化二亚苯基碘嗡（DPI）及JAK抑制剂AG490干预，正常对照组不加任何药物。各组处理不同时间后，采用流式细胞检测细胞内ROS水平；采用免疫细胞化学检测磷酸化JAK2及STAT3蛋白表达；采用RT-PCR检测TIMP-1mRNA、MMP-1mRNA的表达。结果①免疫细胞化学检测显示，瘦素刺激HSC-T6细胞2h后细胞质p-JAK2及细胞核内p-STAT3蛋白表达与正常对照组相比均明显增加（P<0.01），熊果酸干预后p-JAK2及p-STAT3蛋白表达明显低于瘦素刺激组[（85.50±3.78）vs(96.67±3.01)，(26.50±3.66)vs(86.67±10.87)，P<0.01]。NAC、DPI、AG490干预后p-JAK2及p-STAT3蛋白表达也低于瘦素刺激组（P<0.05或P<0.01）。②流式细胞术检测显示，熊果酸、NAC、DPI和AG490干预后的ROS水平均低于瘦素刺激组[（43.62±5.58）、(55.56±6.43)、(36.54±3.21)、(48.12±6.63)vs(90.86±3.86)，P<0.01]，而且熊果酸干预组的ROS水平低于NAC干预组（P<0.01)。③熊果酸干预12、24h后与瘦素刺激组相比，TIMP-1mRNA表达明显下调[（0.28±0.03）vs(0.37±0.01)，(0.29±0.04)vs(0.41±0.03)，P<0.01]，MMP-1mRNA的表达明显升高[（0.33±0.02）vs(0.26±0.02)，(0.37±0.04)vs(0.22±0.04)，P<0.01]。结论熊果酸能阻断瘦素在肝星状细胞信号内信号转导，抑制TIMP-1、上调MMP-1的基因表达。