ERK1/2对胆红素诱导的海马神经元损伤及NF-κB表达的影响

目的研究细胞外信号调节蛋白激酶（extracellularsignal-regulatedproteinkinase，ERK）1/2对胆红素诱导的大鼠海马神经元核转录因子-κB（nucleartranscriptionfactors，NF-κB）表达的影响，及其对抗胆红素神经元毒性的可能机制。方法将原代培养的海马神经元分为对照组、胆红素组、PD98059（MEK/ERK抑制剂）+胆红素组及芥酸精（erucin，ERN，ERK激活剂）+胆红素组。采用改良噻唑蓝比色法（MTT法）和AnnexinV-FITC/PI双染色法，检测各组细胞相对存活率及凋亡率；免疫细胞化学法检测NF-κBp65蛋白表达。结果正常组、ERN+胆红素组、胆红素组、PD98059+胆红素组细胞相对存活率分别为100%、（80.020±8.552）%、（67.546±3.241）%、（50.591±3.981）%，各组比较有统计学差异（P<0.01）。同一时间点各组NF-κB蛋白平均光密度（meanopticaldensity，MOD）值均有统计学差异（P<0.01），对照组最低；胆红素组NF-κB蛋白MOD值在胆红素作用3h（0.266±0.033）时较高，随时间延长逐渐下降，24h（0.183±0.021）时最低（P<0.01）；PD98059+胆红素组NF-κB蛋白MOD值变化趋势同胆红素组，但MOD值明显下降（P<0.05）；与胆红素组相反，ERN+胆红素组MOD值在胆红素作用3h（0.128±0.028）时较低，随时间延长逐渐升高，24h（0.305±0.043）时最高（P<0.01）。结论胆红素诱导海马神经元NF-κB表达具有时间依赖性；ERK1/2通路在胆红素诱导的海马神经元损伤过程中起保护作用，可能与ERK1/2通路抑制胆红素诱导的海马神经元NF-κB早期（3~6h）表达、而促进其晚期（24h）表达有关。