肺炎链球菌溶血素诱导THP-1细胞凋亡涉及MAPK1/3信号途径

目的探讨肺炎链球菌溶血素（pneumolysin，Ply）对人急性单核细胞白血病单核细胞株THP-1细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用及机制。方法MTT法检测Ply对THP-1细胞的增殖抑制。瑞氏染色观察Ply对人THP-1细胞形态的影响。AnnexinV-FITC/PI双标法检测细胞凋亡。琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞DNA片段化现象。免疫组化和Westernblot检测MAPK1/3蛋白表达的变化。结果将人THP-1细胞分别与0.05、0.1、0.5、1、2.5、5μg/mlPly共同孵育后，在24、48、72、96h用MTT法检测细胞增殖抑制率，发现Ply对人THP-1细胞具有明显的增殖抑制作用，并且呈剂量和时间依赖性，IC50（24h）为1.31μg/ml；0.05μg/ml和0.1μg/mlPly分别处理THP-1细胞12h后，通过瑞氏染色法观察人THP-1细胞可见凋亡小体及核碎裂象等典型的凋亡形态学改变；用0.05μg/mlPly和0.1μg/mlPly作用THP-1细胞12h后细胞早期凋亡率分别为11.83%和48.45%(P<0.05)；提取凋亡THP-1细胞DNA，进行琼脂糖凝胶电泳可见典型的“梯状”条带；Ply作用于人THP-1细胞后，胞内MAPK1/3蛋白表达降低(P<0.05)。结论Ply可诱导人THP-1细胞凋亡，此作用涉及MAPK1/3信号通路的参与。