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ISSN: 2333-9721
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一种高特异性和灵敏性的HBVcccDNA检测方案研究

, PP. 2127-2129

Keywords: 乙型肝炎病毒,共价闭合环状DNA,病毒单质颗粒,肝组织,血清

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Abstract:

目的建立一种TaqMan探针的实时PCR检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA(cccDNA)方案。方法根据rcDNA与cccDNA结构差异,在缺口两侧设计引物,应用TaqMan探针分析,加入1种可以去除rcDNA和部分扩增产物的依赖ATP的内切酶(Plasmid-SafeATP-dependentDNase)。结果通过高速离心获得病毒单质颗粒验证了该方案的特异性;通过克隆和酶切得到3.2kb的环状DNA验证了方案的灵敏性。乙肝患者血清、肝组织cccDNA占总HBVDNA的比例分别为0.03%~0.81%、0.4%~28.0%。结论成功地建立了以TaqMan探针检测血清和肝组织HBVcccDNA的实时PCR检测方法。

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