利用2DE-MS技术筛选和鉴定大肠癌血清标志物

目的利用2DE-MS技术对大肠癌患者血清和正常人血清蛋白进行比较分析，筛选和鉴定差异蛋白。方法收集正常人（n=10）和大肠癌患者（n=15）术前血清，进行去除白蛋白和免疫球蛋白及脱盐浓缩预处理，应用2DE-PAGE分离处理后血清蛋白，比较两者的差异蛋白质点，采用MALDI-TOF分析鉴定差异蛋白质。结果血清经预处理后，可提高样品的上样量，2DE-PAGE图谱的蛋白质点数明显增加，水平条带明显减少。大肠癌患者血清中共筛选2个差异的蛋白点，经质谱鉴定为转甲状腺素蛋白（transthyretin,TTR）和细胞角蛋白1（cytokeratin-1,CK-1）。其中TTR在大肠癌患者血清中为低表达，而CK-1为高表达。大肠癌患者血清中TTR含量为（245.87±60.72）mg/L，明显低于大肠腺瘤组和正常血清组[分别为（299.53±67.91）、（311.31±67.01）mg/L，P<0.01]。结论2DE-MS技术是筛选和鉴定疾病血清标志物的良好工具，TTR可能是大肠癌潜在的血清标志物。