珠子参总皂苷通过促进Nrf2转位拮抗新生大鼠心肌细胞氧化应激损伤

目的观察珠子参总皂苷H2O2所致氧化应激损伤保护效应并探讨其机制。方法Wistar乳鼠心肌细胞原代培养，用H2O2建立氧化应激损伤模型，然后用珠子参总皂苷（100、200μg/ml）孵育24h后，观察细胞搏动频率，MTT法检测珠子参总皂苷对细胞活力的影响，流式细胞仪和Hoechst33258染色检测珠子参总皂苷对氧化应激诱导细胞凋亡及胞内ROS含量的影响，比色法测定培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）含量，同时检测培养液中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性及丙二醛（MDA）含量，实时定量PCR技术检测珠子参总皂苷对SOD/GPX/CAT反应系统SOD1、SOD2、SOD3、CAT和GPX1基因表达的影响，Westernblot检测珠子参总皂苷对细胞质和细胞核Nrf2蛋白表达的影响。结果H2O2明显影响细胞活力和诱导凋亡(IC50为500μmol/L)，珠子参总皂苷（100、200μg/ml）处理能显著增加心肌细胞搏动频率和存活率（P<0.01），抑制心肌细胞凋亡和改善细胞形态，降低细胞内ROS含量（P<0.01）；减轻H2O2所致乳鼠心肌细胞培养液中LDH、CK释放量，同时能够升高SOD、CAT和GSH-Px活性，降低MDA含量（P<0.05，P<0.01）；上调SOD/GPX/CAT反应系统基因表达水平和促进Nrf2核移位，增加心肌细胞核内Nrf2的表达水平（P<0.05，P<0.01）。结论珠子参总皂苷抑制心肌细胞氧化应激损伤，与Nrf2抗氧化途径的激活和清除ROS有关。