鼻咽癌畸胎瘤细胞源性生长因子表达及siRNA对HNE-1细胞株增殖的抑制

目的探讨畸胎瘤细胞源性生长因子（PCcell-derivedgrowthfactor，PCDGF）在人鼻咽癌中的表达，研究小干扰RNA（smallinterferingRNA，siRNA）对鼻咽癌HNE-1细胞增殖的影响。方法采用免疫组织化学的方法检测34例鼻咽癌、20例鼻咽慢性炎症组织中PCDGF蛋白的表达情况。根据PCDGF基因设计合成2条siRNA，利用LipofectamineTM2000转染鼻咽癌HNE-1细胞。通过PT-PCR、Westernblot、荧光免疫细胞化学法检测转染后细胞PCDGFmRNA和蛋白表达，采用MTT检测转染后细胞的生长增殖情况，FCM法检测细胞周期分布。结果34例鼻咽癌组织中PCDGF阳性表达率为85.3%(29/34)，20例鼻咽部慢性炎症组织中阳性率为15.0%(3/20)，2组间差异有统计学意义（P<0.01）。2条重组质粒均能特异性的抑制PCDGFmRNA和蛋白的表达，其中siRNA-1的沉默效率最高。转染48h后，HNE-1细胞中PCDGFmRNA和蛋白表达水平分别下调64.7%和69.8%，细胞增殖抑制率为(37.07±12.4)%，siRNA-1组G0/G1期细胞增多,S期细胞数量明显减少（P<0.05），细胞周期被阻滞于G1期。结论特异性siRNA能够有效沉默PCDGF基因表达，并显著抑制鼻咽癌HNE-1细胞增殖。