转染hRAMP1的间充质干细胞对心肌梗死后局部血管再生的作用

目的探讨腺病毒介导hRAMP1基因转染间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSCs）移植对心肌梗死后新生血管生成及其可能机制。方法密度梯度离心并贴壁培养获得兔骨髓MSCs，并分别转染pAd2-hRAMP1或pAd2-EGFP后给予CGRP刺激，ELISA法测定细胞培养上清液中VEGF和HGF水平。建立心肌梗死再灌注兔模型，采用随机数字表法分为MSChRAMP1组（pAd2-hRAMP1转染MSCs移植）、MSCnull组（pAd2-EGFP转染MSCs移植）组和对照组（等量生理盐水注射）（n=10）。2周时Westernblot检测心肌梗死组织促血管生长因子VEGF和HGF蛋白表达；4周时TTC染色测定心肌梗死面积比；抗CD31免疫组化染色检测心肌梗死区及梗死周边区新生毛细血管密度。结果CGRP诱导72h后MSChRAMP1培养上清液中VEGF和HGF水平显著高于MSCnull组[VEGF：(1859.4±267.4)vs(1344.4±137.2)；(1052.2±239.3)vs(683.8±150.5)pg/ml，P<0.05]。细胞移植后4周TTC染色检测显示MSChRAMP1组心肌梗死面积显著降低对照组和MSCnull组[（10.1±2.9）%vs（30.6±2.7）%和（22.5±3.2）%，P<0.05]；抗CD31免疫组化染色显示，MSChRAMP1组的梗死区和梗死交界区新生毛细血管计数明显高于对照组和MSCnull组（P<0.05）；Westernblot检测显示细胞移植后2周MSChRAMP1组心肌梗死区促血管生长因子VEGF和HGF蛋白表达显著高于对照组和MSCnull组（P<0.05）。结论MSChRAMP1能通过提高梗死区心肌组织中促血管生长因子VEGF和HGF的表达，促进心肌梗死区和梗死交界区新生毛细血管生成，降低心肌梗死面积。