腺病毒载体介导hRAMP1调节兔颈动脉球囊损伤后炎症细胞因子表达对增生内膜的影响

目的探讨腺病毒载体介导人受体活性修饰蛋白-1（receptoractivitymodifyingprotein-1，hRAMP1）基因对兔颈动脉粥样硬化并球囊成形术后炎性细胞因子表达的影响。方法建立兔动脉粥样硬化狭窄模型并行球囊损伤血管（简称血管成形术），随机抽样分为RAMP1组（n=18）和对照组（n=18），经球囊局部注射携带hRAMP1基因腺病毒载体（pAd2-GFP-RAMP1）或PBS，于注射后7、14d和28d，应用ELISA法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和C-反应蛋白（CRP）表达水平；Westernblot检测局部hRAMP1目的基因表达；免疫组织化学染色测定血管局部TNF-α表达，HE染色检测血管形态学。结果血管成形术后不同时间点TNF-α表达增加[7d：（74.13±4.99），14d：（93.40±6.69），28d：（67.46±6.57）]，外源hRAMP1注射后TNF-α表达下降[7d：（64.95±6.77）,14d：（75.29±4.73）,28d：（45.08±5.00），P<0.05]，病毒注射后7d和14dRAMP1组CRP水平[7d：（29.27±1.57），14d：（9.68±1.60）]与对照组比较[7d：（43.96±7.88），14d：（13.51±1.68）]显著下降（P<0.05），28d2组间无差异性；腺病毒注射后28d损伤血管局部仍检测到hRAMP1蛋白表达，同时RAMP1组局部TNF-α表达与对照组比较明显下降，HE染色显示：RAMP1组新生内膜面积[7d：（0.07±0.18），14d：（0.15±0.05），28d：（0.35±0.05）]与对照组[7d：（0.14±0.02），14d：（0.39±0.09），28d：（0.56±0.05]比较明显降低（P<0.05）。结论外源hRAMP1基因调节兔动脉粥样硬化并血管成形术后CRP和TNF-α的表达，抑制血管成形术后再狭窄。