接合物蛋白Crk与CrkL在卵巢癌细胞株MCAS细胞增殖中的不同作用

目的探讨接合物蛋白Crk和CrkL在卵巢癌细胞株MCAS细胞增殖中的不同作用。方法采用免疫共沉淀法检测上皮性卵巢癌细胞株MACS中Crk和CrkL蛋白与已知的与肿瘤增殖相关的上下游结合蛋白的内源性结合；用可调节性siRNA敲低MACS细胞中内源性的Crk及CrkL，观察二者对细胞生长及存活能力的影响。结果免疫共沉淀显示卵巢癌细胞株MACS中，Crk与影响细胞生长增殖的上游蛋白p130Cas及下游蛋白Sos的结合明显强于CrkL,尽管Crk与CrkL表现出部分相同的免疫原性。免疫印迹显示在加入Dox后即Crk或CrkL表达沉默被启动。Crki/CrkLi细胞中加入Dox后Crk与CrkL表达明显降低[Dox+：Crk（0.021±0.001），CrkL（0.676±0.005）；Dox-：Crk（0.544±0.003），CrkL（1.282±0.007），P<0.05]。对可调节性siRNA构建之可控性Crki/CrkLi细胞的连续动态观察发现，Crki细胞表现出细胞增殖力受限仍保存生存活力，而CrkLi细胞则表现出逐渐脱壁至死亡。结论Crk及CrkL在卵巢癌细胞MCAS的恶性增殖中扮演着不同的作用，Crk蛋白的过度表达可能直接影响着卵巢癌细胞恶性增殖，而CrkL则可能更多地参与了细胞基本生存相关的生物行为。