分枝杆菌噬菌体Chy2的分离及生物学特性

目的分离鉴定新分枝杆菌噬菌体并研究其生物学特性。方法以平板法从泥土中分离纯化噬菌体，紫外线诱导法鉴定溶原性，从噬菌斑大小、颗粒形态和限制性内切酶分析三方面比较Chy2、D29、TM4异同；以不同感染复数(MOI)扩增Chy2，测定最佳MOI；通过一步生长实验测出Chy2潜伏期、裂解期和裂解量；采用单斑法测定MOI的裂解谱；检测MOI在不同pH值培养基中裂解耻垢分枝杆菌mc2155的能力。结果成功分离纯化1株分枝杆菌噬菌体，命名为Chy2，其噬菌斑圆形透明，紫外线诱导法处理宿主菌后不能形成噬菌斑，头部呈椭圆形，长尾，基因组核酸能被双链DNA内切酶EcoRⅠ、HindⅢ、BamHⅠ及XbaⅠ切开，大小约49kb，与D29、TM4差异大；Chy2最佳MOI为9.58×10-5；Chy2一步生长周期为270min，潜伏期210min，裂解期60min，裂解量为23；Chy2能裂解耻垢分枝杆菌mc2155、结核菌标准株H37Rv、多数临床耐药株；在7H9固体培养基pH值为5.0和7.4时，Chy2均能裂解耻垢分枝杆菌mc2155。结论Chy2属长尾噬菌体科，基因组为双链DNA，宽噬谱广，是一种潜在的抗结核药物资源。