人参多糖对K562细胞凋亡与细胞周期的影响及其机制

目的探讨人参多糖(ginsengpolysaccharide,GPS)诱导白血病细胞K562凋亡和周期阻滞的机制。方法取对数生长期的K562细胞，调整密度为7×108/L，空白对照组予以常规培养；GPS组加入400mg/LGPS。流式细胞仪测定细胞的凋亡率及细胞周期分布变化；RT-PCR检测细胞ERK表达的变化。免疫组化的方法检测细胞中p-ERK、NF-κB、CyclinD1蛋白定位及表达量的变化。Westernblot检测细胞中ERK、p-ERK、NF-κB、CyclinD1蛋白的变化。结果与对照组比较，K562细胞在400mg/LGPS的作用下，体外培养24、48、72h后，GPS组细胞凋亡率显著增高（P<0.05），周期分布检测结果显示，与对照组相比，GPS组K562细胞G0/G1期细胞数量呈时间依赖性增多（P<0.05），G2+M、S期细胞数量则明显减少（P<0.05）。RT-PCR检测结果显示，400mg/LGPS处理48h组ERKmRNA的表达水平明显低于对照组（0.20vs0.50，P<0.05）。免疫组化显示p-ERK、NF-κB、CyclinD1主要分布在细胞核和细胞质，与对照组相比，GPS组K562细胞内p-ERK、NF-κB、CyclinD1的表达明显减弱。Westernblot检测结果显示，ERK总蛋白无明显变化（P>0.05），而p-ERK、NF-κB、CyclinD1随时间变化有减少趋势，且在48h减少明显，差异有统计学意义（P<0.05）。结论人参多糖GPS可促使K562细胞周期阻滞在G0/G1期，并诱导K562细胞凋亡，且均呈时间依赖性。GPS促进K562细胞凋亡、导致其细胞周期阻滞的机制可能是通过抑制ERK/NF-κB信号通路的激活，进而下调CyclinD1来实现的。