脂肪源性神经干细胞诱导分化为γ-氨基丁酸能神经元的体外研究

目的探讨诱导脂肪源性神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)分化为GABA能神经元的体外培养方法，为细胞移植修复神经系统损伤提供种子细胞。方法贴壁培养C57BL/6小鼠（附睾脂肪垫）脂肪来源的干细胞（adipose-derivedstemcells,ADSCs），流式细胞仪进行表型鉴定（CD45、CD90、CD105）及标志物纤连蛋白（fibronectin）鉴定后，在碱性成纤维细胞生长因子（basicfibroblastgrowthfactor,bFGF）、表皮生长因子（epidermalgrowthfactor,EGF）、2%B27的Neurobasal培养基中诱导成NSCs。用免疫荧光细胞染色法进行NSC特异性标记物Nestin、增殖能力BrdU检测，再次添加脑源性神经营养因子、骨形成蛋白2后，维甲酸（RA）诱导分化为γ-氨基丁酸能神经元,并进行其标志物GABA的检测。结果分离纯化的ADSCsCD90、CD105表达强阳性，CD45表达阴性；诱导后的干细胞球经Nestin及BrdU鉴定为NSCs，且具有较强的增殖能力；神经干细胞诱导分化后的神经元GABA抗体染色呈阳性。结论在特定神经营养因子作用下，ADSCs在体外诱导生成的NSCs可被诱导分化为GABA能神经元。