苦柯胺B拮抗细菌内毒素和CpGDNA的实验研究

目的观察中药活性成分苦柯胺B（kukoamineB,KB）体内外拮抗脓毒症的药理活性。方法采用双偏振极化干涉测量技术测定KB与大肠埃希氏菌LPS、CpGODN1826的亲和力，并用鲎试剂法检测KB对大肠埃希氏菌LPS的体外中和作用，采用ELISA法体外检测KB对LPS和CpGDNA单独刺激RAW264.7细胞释放炎症介质TNF-α和IL-6的抑制作用，ELISA法检测热灭活大肠埃希菌和热灭活金黄色葡萄球菌刺激RAW264.7细胞释放炎症介质TNF-α和IL-6的抑制作用。在腹腔注射热灭活细菌菌液小鼠脓毒症模型中，将BALB/c小鼠分为对照组、KB（低、中、高剂量）组、和临床药物组（血必净和乌司他丁），观察比较7d内各组动物死亡率。结果KB与LPS和CpGODN1826的KD值分别为7.38nmol/L和197.2nmol/L，在体外KB能够明显抑制LPS对鲎试剂的促凝作用（P<0.05，P<0.01），对热灭活细菌刺激RAW264.7细胞释放TNF-α和IL-6具有显著的抑制作用，并呈现明确的量效关系（P<0.05，P<0.01）。在体内实验中，KB对重度和极重度脓毒症模型均具有明确的保护作用，KB组小鼠生存率显著高于对照组和临床药物组（P<0.05，P<0.01）。结论KB作为一种多病原分子的中和剂，能够抑制炎症介质的释放，发挥对脓毒症模型小鼠的保护作用，且效果显著优于现有临床用药血必净和乌司他丁。