嗅鞘细胞移植后通过分泌MMP-3在RCS-P+大鼠视网膜中迁移

目的初步研究将嗅鞘细胞（olfactoryensheathingcells，OECs）及嗅球成纤维细胞（olfactorynervefibroblasts，ONF）混合细胞移植到皇家外科学院大鼠（RoyalCollegeofSurgeonrat，RCS-P+rat）的视网膜下腔后，OECs/ONF迁移进入视网膜的机制。方法离体实验中，取成年RCS-rdy+-P+大鼠的嗅球培养OECs/ONF至14d行OECs/ONF的基质金属蛋白酶-3（matrix-metalloproteinase-3，MMP-3)细胞免疫荧光染色。收集5、8、11、14dOECs/ONF培养液上清，与普通培养液超滤后进行酶联免疫吸附实验（ELISA），检测MMP-3的含量变化。在体实验中，制作40只RCS-P+大鼠单眼视网膜下腔细胞移植，并以对侧眼作为伪手术组以及相同天龄未处理大鼠作为对照组。术后7、14、21、28d用ELISA法检测细胞移植组、伪手术组及未处理组大鼠视网膜中MMP-3含量的变化。将携带绿色荧光的慢病毒感染后的OECs/ONF移植到4只RCS-P+大鼠视网膜下腔，激光共聚焦显微镜观察移植后7、14、21d及28dOECs/ONF在视网膜中迁移情况。结果离体实验中，培养14d时OECs/ONF的MMP-3免疫细胞化学染色阳性。OECs/ONF培养液上清MMP-3含量分别为5d（2.83±0.80）、8d（6.34±1.12）、11d（11.65±1.35）、14d（19.11±2.11），明显高于普通D/F12+10%FBS培养液（1.65±0.44）（P<0.01）；在体实验中，移植后21d及28d，OECs/ONF移植组视网膜MMP-3的含量[（1.80±0.29）、（3.96±0.51）]明显高于伪手术组[（1.17±0.20）、（1.83±0.26）]和未处理组[（1.19±0.17）、（1.92±0.25）]（P<0.01）,伪手术组与未处理组之间无明显统计学差异（P>0.05）。激光共聚焦显微镜观察可见移植后7～28d，OECs/ONF在视网膜中迁移，最远能够达到神经节细胞层。结论OECs/ONF移植到RCS视网膜下腔后，可能通过分泌MMP-3在RCS-P+大鼠视网膜中迁移。