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ISSN: 2333-9721
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PEI/ASON纳米组装体对肺腺癌A549细胞增殖活性及其hTERT基因表达的影响

, PP. 749-753

Keywords: 聚乙烯亚胺,反义寡核苷酸,肺癌细胞系A,端粒酶逆转录酶

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Abstract:

目的以聚乙烯亚胺多聚阳离子纳米载体（polyethylenimine,PEI）作为端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)载体转染A549细胞，研究其对A549细胞的增殖活性及hTERTmRNA表达的影响。方法采用MTT法检测PEI/ASODN纳米组装体对细胞的增殖作用情况；激光共聚焦显微镜检测5′-FITC标记的ASODN(FASODN)转染细胞后PEI/FASODN纳米组装体的细胞摄入情况；RT-PCR检测转染后hTERTmRNA的表达；免疫细胞化学技术检测端粒酶hTERT蛋白的表达；流式细胞术Annexin-V-FITC和PI双标法检测细胞凋亡情况；PEI/ASON-PEG-CNGR组装体动物体内分布实验观察NGR的肿瘤靶向作用。结果PEI/ASODN纳米组装体转染细胞后产生良好的生长抑制作用；FASODN转染细胞后，PEI/FASODN组细胞内有大量荧光物质，而单纯FASODN组细胞内无明显荧光；RT-PCR检测结果表明PEI/ASODN纳米组装体作用于A549细胞72h时，hTERTmRNA水平明显降低，与空白对照组相比有显著差异（P<0.05）；细胞hTERT蛋白的表达也显著降低；转染72h后PEI/ASODN组出现明显早期凋亡和晚期凋亡,凋亡率分别为36.53%和54.28%；动物体内分布实验表明PEI/ASON-PEG-CNGR具有良好的肿瘤靶向作用。结论PEI介导的hTERTASODN能有效抑制A549细胞增殖，降低hTERTmRNA水平从而抑制hTERT蛋白的表达，使细胞产生凋亡，对该细胞生长有明显抑制作用。

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