银杏酚酸通过抑制PKD-2活性提高Tca8113细胞对化疗药物的敏感性

目的探讨蛋白激酶D-2(proteinkinaseD-2，PKD-2)在银杏酚酸（ginkgolicacid，GA）提高舌鳞状细胞癌细胞株Tca8113对化疗药物敏感性过程中的作用。方法通过MTT方法检测GA对Tca8113的增殖抑制及提高Tca8113对化疗药物敏感性；Westernblot检测在GA不同作用时间下PKD-2在Tca8113中的表达及磷酸化特性；利用shRNA干扰技术基因沉默Tca8113中的PKD-2基因；利用佛波酯（PMA）诱导Tca8113中的PKD-2高磷酸化；以MTT方法检测经shRNA干扰后的Tca8113和及经PMA诱导后的Tca8113细胞对GA及化疗药物的敏感性。结果GA抑制Tca8113生长的半数抑制浓度（IC50）为20mg/L，GA明显提高Tca8113对化疗药物卡铂（CBP）和紫杉醇（PTX）的敏感性，分别提高4.37倍和39.20倍（P<0.05）；在野生型Tca8113中与非磷酸化PKD-2蛋白质表达相比较，GA对Tca8113中磷酸化PKD-2蛋白质的表达呈时间依赖性抑制作用（P<0.05）；经shRNA沉默后的Tca8113细胞建立稳定细胞株，同与GA联合用药作用相似，PKD-2基因沉默后的Tca8113细胞对CBP和PTX的敏感性明显提高，分别提高1.6517倍和1.5016倍（P<0.05）；PMA激活Tca8113中的PKD-2后，Tca8113对CBP和PTX的敏感性明显降低，同时发现GA能明显拮抗PMA作用。结论GA通过抑制PKD-2活性途径提高Tca8113对化疗药物的敏感。