胆汁酸G-蛋白偶联受体通过p38MAPK通路诱导巨噬细胞IL-1β、TNF-α和IL-6的转录

目的观察胆汁酸G-蛋白偶联受体（Gprotein-coupledreceptorforbileacids,TGR5）被齐墩果酸（oleanolicacid，OA）激活后对RAW264.7细胞白细胞介素-1（interleukin-1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactorα，TNF-α）和白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）转录的影响及其机制的探讨。方法通过实时荧光定量（Real-time）PCR法检测OA作用不同时间RAW264.7细胞和原代枯否细胞IL-1β、TNF-α和IL-6mRNA的表达；并进一步分析在RAW264.7细胞中加入3种不同信号通路的抑制剂对上述3种炎症因子mRNA表达的影响。OA作用RAW264.7细胞和原代枯否细胞不同时间后，Westernblot分析p38MAPK的磷酸化水平。结果OA刺激RAW264.7细胞6、12、24h后，IL-1β、TNF-α和IL-6mRNA表达明显升高。OA作用于分离的原代枯否细胞3h和6h后，也可观察到相同的结果。p38MAPK特异性抑制剂SB203580可以明显地抑制OA诱导的RAW264.7细胞内IL-1β、TNF-α和IL-6mRNA的表达，但PKA和NF-κB的抑制剂无此作用。RAW264.7细胞和原代枯否细胞经OA刺激后，p38MAPK磷酸化水平明显增强。结论TGR5可能通过活化p38MAPK磷酸化诱导炎症细胞IL-1β、TNF-α和IL-6mRNA的表达，提示TGR5在无其他刺激因素作用下，具有诱导炎症因子表达的作用。