转录辅助因子PC4参与大鼠骨髓间充质干细胞体外衰老过程的调控

目的研究转录辅助因子PC4（transcriptionalpositivecoactivator4）在骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells,MSCs）体外传代衰老过程中的表达变化特点，初步探讨其在MSCs增殖和衰老中的可能作用。方法通过CCK-8法检测并绘制MSCs生长曲线，流式细胞术检测MSCs免疫表型，通过RT-PCR和Westernblot检测PC4在MSCs长期体外培养中的表达特点，并检测细胞衰老标志物β-半乳糖苷酶活性的变化，进一步通过RNA干扰抑制PC4表达，检测其对MSCs增殖和衰老的影响。结果本实验分离培养的MSCs早期具有成体干细胞特性，长期体外连续传代后出现细胞衰老，β-半乳糖苷酶染色呈阳性，PC4在衰老细胞中的表达明显降低，RNA干扰抑制PC4表达后，MSCs增殖受到抑制，β-半乳糖苷酶染色阳性率增加［转染后48h阴性对照组（8.8±2.5）%，空白对照组（5.7±1.8）%，siRNA组（56.3±4.9）%,P<0.05］。结论转录辅助因子PC4可能参与了体外连续传代培养过程中MSCs增殖活性降低和衰老过程的调控。