Geminin基因过表达对VSMCs表型转化的影响

目的探讨Geminin基因过表达对血管平滑肌细胞（vascularsmoothmusclecells，VSMCs）表型转化的影响。方法构建真核表达载体pEGFP-N1-Geminin，脂质体2000介导转染不同表型（去分化型和分化型）的大鼠VSMCs株，设置阳性组、阴性组和空白组（n=3），检测转染效果、VSMCs主要表型标志物（α-actin、OPN）和肌动蛋白相关蛋白1（actinrelatedprotein，ARP1）的变化情况。结果Geminin基因成功过表达VSMCs株。与2个对照组（阴性组和空白组）比较，分化型VSMCs中表型标志物（α-actin和OPN）及ARP1含量变化不大；去分化型VSMCs中，OPN在阳性组中表达下调，与2个对照组（阴性组和空白组）比较差异具有统计学意义（P<0.05），α-actin和ARP1在阳性组中表达上调，与2个对照组（阴性组和空白组）比较差异具有统计学意义（P<0.05），免疫共沉淀实验结果提示经proteinGplus-Agarose沉淀ARP1相互作用蛋白复合物后，用Geminin抗体进行Westernblot检测，可以检测到Geminin的表达。结论Geminin基因过表达有助于VSMCs由去分化型向分化型转化；免疫共沉淀结果提示Geminin和ARP1之间存在相互作用，ARP1可能参与了上述VSMCs表型转化过程。