乙肝病毒X蛋白对油酸钠诱导HepG2细胞脂质沉积的影响

目的探讨乙肝病毒X蛋白（hepatitisBvirusXprotein,HBx）是否增加油酸钠诱导HepG2细胞的脂质沉积。方法将质粒pIRES2-eGFP-HBx瞬时转染入HepG2细胞中，建立表达HBx的细胞模型（HepG2-HBx）；以转染空载体pIRES2-eGFP（HepG2-pIRES2）和HepG2细胞（HepG2）作对照。观察转染后绿色荧光蛋白（GFP）的表达；转染后16h开始用油酸钠处理各组细胞24、48h（分别命名为HBx/OA组、空/OA组、G2/OA组），细胞内甘油三酯(TG)含量测定及油红O染色了解细胞内脂质沉积情况；在油酸钠处理细胞24h，RT-PCR法检测SREBP-1和LXRα的mRNA表达水平,Westernblot检测HBx、LXRα及FAS蛋白表达水平。结果转染后16hHepG2-HBx细胞和HepG2-pIRES2细胞中开始有GFP的表达，提示转染成功；仅在HepG2-HBx细胞内有HBx表达，表明HepG2-HBx细胞模型构建成功。在相同油酸钠处理的条件下，HBx/OA组细胞内脂质含量和TG含量与对照组相比均明显增加（P<0.01）。在油酸钠处理细胞24h，HBx/OA组细胞内LXRα、SREBP-1的mRNA表达量和LXRα、FAS蛋白表达量较对照组均明显增加（P<0.01/0.05）。结论HBx通过上调HBx-LXRα-SREBP1/FAS通路脂质合成相关基因表达，可能增加HepG2-HBx细胞对外界脂代谢紊乱因素的易感性，从而增加油酸钠诱导HepG2细胞脂质沉积。