靶向卵巢癌的纳米超声微泡造影剂的制备及其体外寻靶研究

目的制备靶向卵巢癌的纳米超声微泡造影剂，鉴定其理化特性并观察其体外寻靶能力。方法采用冷冻干燥超声法制备非靶向纳米超声微泡造影剂（N-N-Mb），通过生物素-亲和素桥连法，将生物素化的促黄体生成素释放激素（luteinzinghormone-releasinghormone,LHRH）与N-N-Mb连接，制备靶向卵巢癌的纳米超声微泡造影剂(LHRH-N-Mb)。观察微泡镜下形态以及室温下保存时间。zeta检测仪检测粒径范围、表面电位，流式细胞术检测二抗分别与LHRH-N-Mb、N-N-Mb结合率，光镜下观察LHRH-N-Mb与LHRH受体过表达的人卵巢癌OVCAR-3细胞结合情况。结果N-N-Mb、LHRH-N-Mb两种微泡成功制备，两者外观圆整，分布均匀，粒径大小分别为（372±45）、（511±64）nm，集中于360nm与508nm，两者粒径大小比较有统计学差异（P<0.05)。两种微泡电位分别为（-14.5±0.5）、（-14.6±0.8）mV。室温下保存16d后，LHRH-N-Mb理化特性与刚制备时无统计学差异（P>0.05）。二抗与LHRH-N-Mb、N-N-Mb结合率分别为75.6%、0.83%，两者比较有统计学差异（P<0.05)。光镜下OVCAR-3细胞周围可见LHRH-N-Mb围绕或粘附，呈花环样结构，这种靶向结合能被生物素化的LHRH抗体预先阻断。结论通过冷冻干燥超声法和生物素-亲和素桥连法，可成功制备靶向卵巢癌的纳米超声微泡造影剂，此微泡粒径小、稳定性高，且能体外靶向高效结合人卵巢癌OVCAR-3细胞。