索拉非尼诱导肝癌HepG2细胞自噬的机制及意义

目的探讨索拉非尼诱导肝癌HepG2细胞自噬的机制及意义。方法用GFP-LC3质粒转染HepG2细胞后观察索拉非尼对自噬小体形成的影响；免疫共沉淀法检测索拉非尼对Mcl-1与Beclin1之间相互作用的影响；使用siRNA沉默自噬相关基因Atg5或用氯喹（CQ）抑制自噬后观察索拉非尼抗肝癌细胞的效应；Westernblot检测自噬与凋亡相关蛋白Atg5、Beclin1、LC3、Mcl-1与PARP表达的变化。结果索拉非尼处理HepG2细胞后LC3-Ⅱ蛋白表达量呈剂量依赖性增强，索拉非尼处理后转染GFP-LC3的HepG2细胞中出现明显的自噬小体样点状荧光，Westernblot结果显示索拉非尼处理后HepG2细胞中Mcl-1表达下调，Beclin1无明显变化，Co-IP证实在HepG2细胞中Mcl-1和Beclin1间存在蛋白相互作用，索拉非尼能减弱Mcl-1和Beclin1的结合。抑制自噬后能明显增强索拉非尼的杀细胞效应。结论索拉非尼可能通过下调Mcl-1来诱导肝癌HepG2细胞自噬，抑制自噬后可显著增强索拉非尼的杀细胞效应。