ERK途径可能参与抗坏血酸诱导的神经干细胞向多巴胺能细胞分化

目的探讨抗坏血酸(ascorbicacid，AA)诱导神经干细胞(neuralstemcells，NSCs)向多巴胺能神经元方向分化的作用并初步探索其机制。方法从12.5d胚胎大鼠中脑获得NSCs，培养扩增后分为对照组和分别加入1、10、50、100、200μmol/LAA处理组，比较NSCs向多巴胺能神经元分化结果；采用免疫细胞化学对NSCs以及分化后神经元进行鉴定和检测，RT-PCR检测酪氨酸羟化酶（tyrosinehydroxylase，TH）、多巴胺转运子（dopaminetransporter，DAT）、SHH、Nurr1、Ptx3mRNA表达；在AA诱导分化中加入ERK阻断剂PD98059，以探讨ERK通路在分化中的作用。结果获得大量的神经球并且表达nestin强阳性；AA处理组比对照组表现出较强的多巴胺能分化，其中100μmol/LAA诱导组表达TH和DAT阳性细胞数量比对照组明显增加（P<0.05），增加30～50倍；AA诱导增加了Nurr1、TH、DAT、SHHmRNA的表达，ERK抑制剂PD98059能抑制AA诱导后Nurr1、TH、DATmRNA的表达而不影响SHHmRNA表达（P<0.05）。结论抗坏血酸能诱导神经干细胞分化为多巴胺能神经元，ERK途径可能是AA诱导过程中参与多巴胺能分化的途径之一，Nurr1基因可能参与到ERK途径中或者是其下游基因。