Wnt3a诱导小鼠肝前体细胞上皮-间质转化

目的探讨Wnt3a对小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化的影响。方法将表达Wnt3a的腺病毒Ad-GFP-Wnt3a转入小鼠肝前体细胞中，与空白对照组相比，观察其形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察其对小鼠肝前体细胞迁移能力的影响。实时荧光定量Real-timePCR和Westernblot分别检测小鼠肝前体细胞中上皮标志物和间质标志物的表达改变。结果镜下观察，高表达Wnt3a的小鼠肝前体细胞由不规则多边形变为长梭形。细胞划痕实验结果显示，Ad-Wnt3a组细胞48h迁移距离为（0.53±0.05）mm，Ad-GFP组细胞48h迁移距离为（0.33±0.02）mm，相对对照组，其迁移距离增加，差异具有统计学意义(P<0.05)。细胞迁移实验结果显示，Ad-GFP组24h穿过小孔的细胞为（10.33±2.08）个，而Ad-Wnt3a组穿过的细胞为（62.00±3.60）个，相对对照组，其穿过小孔的细胞数量增加，差异具有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR和Westernblot结果显示，间质标志物N-cadherin、vimentin和snail的mRNA和蛋白水平表达上调，相反上皮标志物E-cadherin和CK-18的mRNA水平和蛋白水平表达下调,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论Wnt3a能够促使小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化，提示其可能参与了肝纤维化的发展进程。