HBx介导miR-221上调-ERα下调致HepG2细胞恶性增殖

目的探讨microRNA221(miR-221)在乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus,HBV）感染相关性肝细胞癌（hepatocellularcarcinoma,HCC）中的促癌功能以及HBV基因编码的X蛋白（HBx）诱导miR-221上调促进HepG2细胞异常增殖的分子机制。方法重组HBx腺病毒（Ad-HBx）感染人肝癌HepG2细胞，荧光定量PCR检测HepG2-HBx细胞中miR-221和ERαmRNA表达的变化；流式细胞术检测细胞周期，Westernblot检测雌激素受体α（estrogenreceptorα,ERα)蛋白表达水平变化，分别用miR-221mimic和miR-221inhibitor转染HepG2细胞后，荧光定量PCR检测HepG2-HBx细胞中miR-221和ERαmRNA表达变化；Westernblot检测ERα蛋白水平表达变化。结果RT-PCR实验证实，adv-HBx感染HepG2细胞后，HBx在HepG2细胞中高效表达；感染48h后，HBx蛋白可显著上调miR-221[（495.84±61.16）vs（239.25±21.15），P<0.05]并抑制ERα蛋白[（0.24±0.01）vs（0.61±0.02）,P<0.05]的表达水平，同时促进HepG2细胞异常增殖[（31.73±3.53）%vs（56.08±1.56）%，P=0.01]。miRNA转染实验及Westernblot证实：miR-221抑制ERα蛋白的表达（P<0.05)，miR-221抑制剂促进ERα蛋白的表达（P<0.05)。结论HBx可能通过上调miR-221进而下调ERα对肝癌的保护性效应而促进肝癌细胞异常增殖，靶向miR-221的策略具有抑制肝癌细胞增殖的治疗潜能。