基底硬度对肝细胞胞间粘附复合物稳定性的影响

目的通过比较汇合生长肝细胞（L02）对不同硬度基底（3.6、10kPa和30kPa）的响应，探查细胞间粘附复合物稳定性差异的成因。方法运用实时显微拍摄观察L02细胞在不同硬度基底上的形态特征；采用免疫荧光染色技术检测细胞肌动蛋白骨架构象和β-连环蛋白表达分布；应用Westernblot方法检测β-连环蛋白的表达及其磷酸化水平。结果①不同硬度基底上汇合生长L02细胞间粘附复合物稳定性不同，在乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraaceticacid,EDTA)作用下随基底硬度增加，细胞分离时间缩短；②汇合生长L02细胞在软基质上肌动蛋白骨架成皮质下环，β-连环蛋白分布于细胞连接处。随着基底硬度增大，细胞骨架环变得不完整，胞内骨架呈放射状分布，β-连环蛋白弥散分布于细胞质中；③随基底硬度增加L02细胞膜上β-连环蛋白表达显著降低（P<0.01），细胞质中磷酸化的p-β-连环蛋白(Tyr654)的表达量显著增加（P<0.01）。结论基底硬度影响肝细胞粘附复合物稳定性，基底硬度越大复合物稳定性越差，这与基底硬度增加导致的p-β-连环蛋白(Tyr654)表达量增高有关。