内毒素耐受导致的GSK-3抑制对急性内毒素性肝损伤的保护机制

目的探讨内毒素（lipopolysaccharide,LPS）耐受导致的糖原合成酶激酶-3(glycogensynthasekinase-3,GSK-3)活性抑制对急性内毒素性肝损伤产生保护效应的潜在机制。方法建立LPS和GSK-3抑制剂氯化锂（LiCl）预处理的SD大鼠模型，采用半定量RT-PCR检测肝组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-10（IL-10）mRNA表达水平，以专用试剂盒检测代表肝组织中性粒细胞浸润程度的髓过氧化物酶（MPO）活性；用密度梯度离心法分离Kupffer细胞，建立LPS耐受和GSK-3抑制剂(LiCl和胰岛素)预处理的Kupffer细胞模型，用中性红法测定细胞吞噬活性；采用激光共聚焦显微镜和Westernblot实验观察Kupffer细胞核因子-κB(NF-κB)p65的亚细胞定位和核转位情况。结果LPS耐受和GSK-3抑制剂LiCl预处理均可减少大剂量LPS攻击导致的肝组织TNF-αmRNA上调表达（P<0.05）、促进IL-10mRNA上调表达（P<0.05），减少LPS攻击导致的MPO活性升高（P<0.05）；LPS耐受和GSK-3抑制剂（LiCl和胰岛素）均能增强Kupffer细胞吞噬活性（P<0.05）；LPS耐受和GSK-3抑制剂LiCl预处理均可减少大剂量LPS导致的NF-κBp65核转位（P<0.05）。结论LPS耐受导致的GSK-3功能活性抑制，可能通过对NF-kappaBp65核转位、炎症细胞因子分泌、中性粒细胞浸润和Kupffer细胞吞噬活性等下游事件产生影响，从而保护急性内毒素性肝脏损伤。