siRNA沉默PTP4A1表达对人舌鳞癌细胞系TCA8113体内外生物学行为的影响

目的探讨特异性沉默人舌鳞癌细胞系TCA8113中PTP4A1基因的表达，并研究沉默该基因表达后对TCA8113细胞体内外生物学行为的影响。方法采用siRNA的慢病毒载体siRNA-PTP4A1作为阳性干扰组（KD），空病毒载体作为阴性对照组(NC)，未作任何处理的TCA8113细胞作为空白对照组(CON)。Real-timePCR和Westernblot检测PTP4A1基因的干扰效果，MTT法检测3组细胞的增殖能力，流式细胞技术分析3组细胞凋亡和细胞周期情况，平板克隆形成实验检测体外克隆形成能力，Westernblot分别检测3组细胞抑制凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax的表达情况，3组细胞分别裸鼠成瘤后观察移植瘤的生长情况。结果siRNA-PTPA1转染TCA8113细胞成功，Real-timePCR和Westernblot检测PTP4A1基因的抑制率达到55%和60%以上（P<0.05）；MTT结果显示KD组细胞增殖能力小于NC、CON组；细胞凋亡率也明显增加，KD组早期凋亡为（17.48±0.70）%，而NC、CON组的早期细胞凋亡率为（7.34±0.70）%和（4.86±0.25）%(P<0.01)；KD组细胞周期阻滞在G1/G0和S期(P<0.05)；Westernblot结果显示Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01)，Bax蛋白表达增高(P<0.01)；KD组体外克隆形成数小于NC、CON组(P<0.01)；KD组裸鼠移植瘤的生长速度缓慢，质量和体积均小于NC、CON组(P<0.01)。结论siRNAPTP4A1在体内外均能有效抑制舌鳞癌TCA8113细胞的恶性生物学行为，PTP4A1基因可能与舌鳞癌的发生、发展相关。