Fibronectin差别黏附法筛选、纯化软骨终板干细胞

目的通过Fibronectin介导进行差别黏附筛选软骨终板干细胞，观察筛选的效果及其初步生物学性能。方法从脊柱融合术中获取椎间盘软骨终板标本，机械-酶消化法获取原代软骨终板细胞，体外扩增至第2代后接种于？Fibronectin？包被过的培养瓶,孵育20min后将未贴壁细胞及培养液转移至新培养瓶再孵育40min,吸弃未贴壁细胞及培养液，所得2瓶细胞进行体外扩增，流式细胞仪检测细胞表面标志物。对筛选后的细胞进行向多系细胞诱导分化。结果第2代细胞筛选前，细胞形态个体差异较大，呈三角形或多角形，融合时呈铺路石样外观，筛选后细胞形态比较均匀，形成细胞克隆群。流式细胞仪检测发现：经Fibronectin筛选后所获软骨终板干细胞CD90、CD73表达阳性率>95%,CD105表达阳性率>85%；经诱导能向骨、软骨及脂肪细胞方向分化。结论Fibronectin筛选所得的软骨终板细胞基本符合国际细胞治疗协会对间充质干细胞的定义标准。Fibronectin差别黏附筛选法得够有效筛选、纯化软骨终板干细胞。