旁分泌机制在脂肪间充质干细胞移植治疗心肌梗死中的作用

目的　　　探讨旁分泌机制在脂肪间充质干细胞（adiopose-derivedstemcells，ADSC）移植治疗心肌梗死中的作用。　　　方法　　　原代分离和培养人ADSC，将经鉴定的第3～5代的ADSC用于实验。①用8～10周龄（20～24g）的雄性C57B/L小鼠，结扎左前降支建立心肌梗死（myocardialinfarction，MI）损伤模型，实验分假手术组，MI+DMEM/F12组和MI+ADSC-CM（conditionedmedium，条件培养液）组（n=12）。在MI处理的小鼠心肌梗死边缘区分别注射DMEM/F12和ADSC-CM，观察动物生存率、TTC染色测量心肌梗死面积、超声评价心功能变化、TUNEL染色检测心肌细胞凋亡等方法评价心肌梗死的治疗效果。②用H2O2建立乳鼠心肌细胞（neonatalratventricularmyocytes，NRVM）体外损伤模型，观察ADSC-CM对心肌细胞的保护作用。实验分对照组，H2O2+DMEM/F12组和H2O2+ADSC-CM组（n=5）。分别用caspase-3蛋白定量和TUNEL染色检测心肌细胞凋亡。　　　结果　　　①相较于DMEM/F12，ADSC-CM显著减少心肌梗死面积[（35.3±0.5%）vs（41.7±1.9%）P<0.05]、提高心功能[EF：（60.4±4.8）%vs（47.2±3.7）%,P<0.05]、减少梗死边缘区心肌细胞凋亡[TUNEL+心肌细胞/106细胞核：（677.4±64.2）vs（867.3±67.9）,P<0.05]；②相对于DMEM/F12，ADSC-CM明显减少H2O2诱导的心肌细胞凋亡[caspase-3蛋白表达下降；TUNEL阳性率：（58.84±2.19）%vs（71.65±0.86）%,P<0.05]。　　　结论　　　ADSC-CM通过减少心肌细胞凋亡发挥对心肌梗死的治疗作用；旁分泌作用是ADSC移植治疗心肌梗死的重要机制。