姜黄素对髓母细胞瘤PI3K/Akt信号通路的作用

目的探讨姜黄素对髓母细胞瘤PI3K/Akt信号通路的作用。方法细胞培养至对数生长期后设对照组（Ct组）和姜黄素处理组（Cur组）。Cur组用20、40、60、80、100μmol/L姜黄素处理24、48、72h。采用MTT法检测姜黄素对髓母细胞瘤Daoy细胞的生长抑制作用。流式细胞术分析Daoy细胞凋亡率；免疫细胞化学染色检测PI3K、p-Akt和Akt在细胞中表达情况；Westernblot和RT-PCR分别检测PI3K、p-Akt和Akt蛋白及mRNA的表达水平。结果不同浓度姜黄素作用不同时间后，细胞受到不同程度的抑制，呈时间-剂量依赖关系（P<0.05）。姜黄素作用48h抑制作用显著，差异有统计学意义（F=131.829，P<0.05），且IC50为35μmol/L，细胞凋亡也最明显（29.7%）。PI3K、Akt和p-Akt蛋白在Ct组中的阳性表达率分别为80.7%、84.8%和87.5%；Cur组阳性表达率均明显下降，分别为25.3%、58.8%和26.7%。两组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。Westernblot显示Ct组PI3K、Akt和p-Akt蛋白灰度比值分别为（1.141±0.032）、（1.047±0.174）、（1.173±0.013）；Cur组PI3K和p-Akt蛋白灰度比值降低，分别为（0.875±0.029）、(0.958±0.150）。两组比较，差异有统计学意义（t=15.530，33.482，P<0.05）。RT-PCR显示Ct组PI3KmRNA灰度比值显著高于Cur组[（1.166±0.031）vs（0.833±0.033）,t=12.468，P<0.05]。结论姜黄素可能通过抑制PI3k/Akt信号通路，阻碍髓母细胞瘤Daoy细胞的增殖、诱导凋亡。