小檗碱减轻炎症反应时肠上皮屏障功能损害的实验研究

目的研究小檗碱（berberine，BBR）在炎症反应时对肠上皮屏障功能的保护作用。方法建立人肠上皮细胞株Caco-2单层培养模型，将单层细胞分为对照组、BBR组、TNF-α+IFN-γ组、TNF-α+IFN-γ+BBR组。用电阻仪测定跨单层肠上皮细胞电阻（TER），测定时相点为处理后0、6、12、24、36h和48h；免疫荧光法和蛋白质印迹法检测紧密连接蛋白Occludin的分布及表达变化；蛋白质印迹法检测肌球蛋白轻链（MLC）和磷酸化肌球蛋白轻链（pMLC）的蛋白表达。结果对照组与BBR组TER均无明显变化；TNF-α+IFN-γ组TER逐渐下降，并于12、24、36h及48h显著低于0h（P<0.05）；TNF-α+IFN-γ+BBR组也呈逐渐下降趋势，但降幅小于TNF-α+IFN-γ组，并于12、24、36h及48h显著高于TNF-α+IFN-γ组（P<0.05）。各组紧密连接蛋白Occludin表达无明显变化（P>0.05）；但TNF-α+IFN-γ组Occludin形态有明显变化，并发生重分布，而TNF-α+IFN-γ+BBR组Occludin形态变化则较TNF-α+IFN-γ组明显减轻。TNF-α+IFN-γ组pMLC表达显著高于对照组或BBR组（P<0.05），而TNF-α+IFN-γ+BBR组pMLC表达则明显低于TNF-α+IFN-γ组（P<0.05）。结论小檗碱通过降低MLC磷酸化水平，改善紧密连接蛋白定位分布变化，从而减轻炎症反应时肠上皮屏障功能损害。