PD-1+肿瘤浸润性CD8+T淋巴细胞的表型鉴定及功能研究

目的从肿瘤局部分离衰竭性CD8+T淋巴细胞（CD8+PD-1+T细胞），并对其功能进行研究，初步探讨机体免疫系统无法有效杀伤和清除肿瘤的原因。方法C57BL/6小鼠皮下注射Lewis肺癌细胞株建立小鼠肿瘤模型。将肿瘤制成单细胞悬液后，染细胞表面标志。采用流式细胞术从肿瘤局部分选CD8+PD-1+T淋巴细胞及CD8+PD-1-T淋巴细胞，体外经非特异性刺激后行细胞内因子染色，检测IFN-γ分泌能力。CFSE细胞染色检测其增殖活性。结果肿瘤局部成功分离得浸润性CD8+T淋巴细胞，其中将近80%的细胞高表达衰竭表型PD-1+。CFSE结果显示CD8+PD-1+T细胞较CD8+PD-1-T细胞增殖活性明显下降；细胞内因子染色后流式细胞术检测结果显示肿瘤局部CD8+PD-1+T细胞较CD8+PD-1-T细胞IFN-γ分泌能力降低约50%。结论肿瘤局部存在一群免疫衰竭性T细胞，可能参与了肿瘤的免疫逃逸。