大鼠肠系膜淋巴结和外周淋巴结固有exosome的制备及其对T细胞增殖的影响

目的从大鼠肠系膜淋巴结、外周淋巴结中分离纯化exosome，鉴定其对T细胞增殖的影响。方法取出BN(RT1n)大鼠的外周淋巴结及肠系膜淋巴结并研磨、离心以获得非细胞组织上清，采用超滤密度梯度离心法提取exosome。透射电镜对收集的exosome进行形态学鉴定，BCA法进行蛋白定量，SDS-PAGE电泳分离蛋白，Westernblot检测IL-10的表达，并通过混合淋巴细胞培养检测其对T细胞增殖的影响。结果两种淋巴组织来源的非细胞组织上清均含有exosome，肠系膜淋巴结源性exosome蛋白浓度[（1.92±0.10）μg/μL]显著高于外周淋巴结源性exosome[（1.57±0.06）μg/μL,P<0.05]，SDS-PAGE显示两种组织源性exosome所含蛋白种类和数量有明显差异，Westernblot显示肠系膜淋巴结固有exosome中IL-10的表达显著高于外周淋巴结固有exosome，混合淋巴细胞培养结果显示肠系膜淋巴结固有exosome和外周淋巴结固有exosome对T细胞的增殖均有促进作用(P<0.05)，外周淋巴结源性exosome的促增殖作用显著大于肠系膜淋巴结源性exosome（P<0.05）。结论肠系膜淋巴结、外周淋巴结均含有组织固有exosome，两种组织来源exosome有蛋白浓度和蛋白种类的差异，且均能促进淋巴细胞增殖，促进程度有显著差异。