epoxomicin可诱发前列腺癌细胞内质网应激蛋白GADD153促进细胞凋亡

目的探讨蛋白酶体抑制剂（epoxomicin，EPO）诱导前列腺癌DU145细胞凋亡及其与GADD153/CHOP的关系。方法不同浓度的EPO处理DU145不同时间，MTS检测细胞生长情况；流式细胞仪检测细胞凋亡率情况；Real-timePCR检测内质网应激的相关分子GADD153、GRP78mRNA以及Westernblot方法检测GADD153、GRP78蛋白表达情况；转染GADD153siRNA从而沉默基因GADD153，通过基因转录水平及蛋白水平检测GADD153证实转染是否成功；转染GADD153后，通过MTS法及流式细胞仪技术检测细胞增殖情况及凋亡情况。结果EPO抑制DU145细胞生长，并呈现剂量、时间依赖。处理组细胞凋亡率高于未处理组，高剂量组凋亡率高于低剂量组。EPO处理后GADD153,GRP78基因转录水平随时间逐渐升高，72h最为明显。GADD153、GRP78蛋白在EPO处理后不断增加，均在72h增加到最高，且低剂量与高剂量组在72h差异有统计学意义（P<0.05）。转染GADD153siRNA后，GADD153基因转录水平及蛋白表达水平明显降低，其中GADD153siRNA50nmol/L最为明显。沉默基因GADD153后，EPO处理DU145细胞，其细胞数目的减少部分被阻断，细胞凋亡部分被阻断。结论蛋白酶体抑制剂epoxomicin能抑制DU145细胞生长，诱导凋亡，其机制可能与激活内质网应激，诱发内质网的相关分子GADD153表达有关。