甲基-β-环糊精对内皮素-1诱导大鼠颈总动脉血管平滑肌细胞胞内钙浓度变化的影响

目的研究甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin，MβCD)对内皮素-1（endothelin-1，ET-1）诱导大鼠颈总动脉血管平滑肌细胞（vascularsmoothmusclecells，VSMCs）胞内钙离子浓度（[Ca2+]i）变化的影响。方法原代培养大鼠颈总动脉平滑肌细胞，通过形态学和免疫荧光染色鉴定。再通过炎症因子TNF-α(100μg/L)和MβCD(5mmol/L)的不同处理将细胞分为4组：PSS液+ET-1组（A组）、PSS液+MβCD+ET-1组（B组）、PSS液+TNF-α+ET-1组（C组）、PSS液+TNF-α+MβCD+ET-1组（D组）。最后各组细胞经Furo-2/AM染色后，采用TILL荧光钙成像系统检测活细胞在ET-1(100nmol/L)刺激下胞内钙荧光强度的变化情况，R(F340nm/F380nm)值代表单细胞胞内钙荧光强度比值。结果TILL荧光钙成像系统检测结果显示A~D组细胞静息状态荧光强度R0值分别为（0.5916±0.0820）、（0.5753±0.0790）、（0.6551±0.0837）、（0.6105±0.0804），组间比较无统计学差异（P>0.05）。各组细胞经ET-1(100nmol/L)刺激后胞内钙荧光强度分别较静息状态上升：A组上升(115±17)％，B组上升(67±15)％，与A组比较差异有统计学意义（P<0.05）；C组上升(279±21)％，与A组比较差异有统计学意义（P<0.01）；D组上升(88±16)％，与C组比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论MβCD破坏caveolae结构后明显降低了VSMCs胞内钙离子浓度升高程度，caveolae可能是抑制脑血管痉挛发生的重要靶点。