5-氮杂-2′-脱氧胞苷抑制肾癌细胞增殖的机制研究

目的探讨5-氮杂-2′-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）抑制肾癌细胞增殖的分子机制。方法采用不同浓度的5-Aza-CdR作用于769-P和ACHN2种肾癌细胞，处理72h后CCK-8法检测其对细胞增殖的影响；5-Aza-CdR处理769-P细胞48h后，流式细胞仪测定细胞周期分布，RT-PCR测定甲基化转移酶DNMT1、DNMT3a、DNMT3b以及细胞信号抑制因子3(suppressorofcytokinesignaling3，SOCS3)的表达，Westernblot测定SOCS3、P21在蛋白质水平的表达；siRNA干扰SOCS3表达以后，加5-Aza-CdR处理769-P细胞48h，Westernblot检测细胞内SOCS3、P21的表达。结果5-Aza-CdR可以剂量性依赖地抑制肾癌细胞系769-P和ACHN的增殖（P<0.05），且使769-P细胞阻滞在G2/M期。RT-PCR检测发现，5-Aza-CdR可以下调DNMT1和DNMT3a的表达和上调SOCS3的表达（P<0.05）。Westernblot检测发现5-Aza-CdR可以促进SOCS3蛋白质的表达，并且伴随着P21蛋白的升高。在干扰SOCS3的表达后，用5-Aza-CdR处理769-P细胞48h，P21的表达明显降低。结论5-Aza-CdR通过抑制甲基化转移酶，增强SOCS3介导P21的表达，从而抑制肾癌细胞769-P增殖。