Trps1调控胆管上皮细胞上皮-间质转化的实验研究

目的探讨毛发鼻指（趾）综合征1型相关基因（tricho-rhino-pharyngealsyndrometype1，Trps1）在冷保存再灌注损伤（coldpreservationreperfusioninjury，CPRI）诱导人肝内胆管上皮细胞（humanintrahepaticbiliaryepithelialcells，HIBECs）上皮-间质转化（epithelial-mesenchymaltransition，EMT）中的作用。方法体外模拟CPRI处理HIBECs检测上皮标志物E-cadherin、CK19，间质标志物Vimentin、α-SMA及目标基因Trps1的表达。用Trps1腺病毒或Trps1siRNA载体转染HIBECs后，重复CPRI诱导实验，探讨Trps1对HIBECsEMT的调控作用。结果随着冷保存时间的延长，上皮标志物E-cadherin、CK19mRNA和蛋白表达持续减少（P=0.018,0.011;P=0.039,0.044），间质标志物Vimentin、α-SMA表达持续增加（P=0.002,0.026;P=0.035,0.016）；冷保存12h，细胞内Trps1mRNA和蛋白表达增加（P=0.018,0.031），其后随冷保存时间延长持续减少（P=0.026,0.009）。相关分析显示在该过程中，Trps1与上皮标志物表达正相关（r=0.981,0.913;P=0.000,0.002），而与间质标志物表达负相关（r=-0.711,-0.847;P=0.009,0.005）。Trps1腺病毒转染HIBEC后，重复上述CPRI诱导实验，E-cadherin表达增加（P=0.002,0.000），Vimentin表达减少（P=0.000,0.017），CPRI诱导HIBECsEMT效应受到抑制；Trps1siRNA转染HIBECs后，重复上述CPRI诱导实验，E-cadherin表达减少（P=0.032,0.044），Vimentin表达增加（P=0.047,0.031），加强CPRI诱导HIBECsEMT效应。结论体外模拟CPRI可诱导HIBECs发生EMT，Trps1参与调控HIBECsEMT，发挥重要的拮抗作用并可能逆转该过程。