肺癌耐药相关基因CA916798核心启动子区域的初步鉴定

目的对肺癌耐药相关基因CA916798的核心启动子区域进行初步鉴定。方法采用PCR方法对CA916798基因上游不同长度的序列片段0H～9H进行扩增，以pGL3-basic载体构建基因报告质粒，转染COS7细胞，荧光素酶检测序列启动活性，酶切鉴定、测序及数据库比对确定核心启动子的可能存在位置，并采用生物信息学方法对核心启动子区域结合位点进行预测。结果成功构建了启动子荧光素酶报告基因；活性实验表明；9H组与阴性对照组比较，相对荧光强度差异具有统计学意义(P<0.05)；0H～8H各组与9H组比较，相对荧光强度差异均具有统计学意义(P<0.05)；9H片段为处于CA916798基因片段上游179bp处，长度为568bp的序列区；功能预测显示该区存在多种细胞因子的结合位点。结论9H序列区域具有较强的启动活性，为基因CA916798的核心启动子序列区域。