PTD-ABD融合蛋白对髓系白血病细胞的增殖和凋亡的影响

目的研究癌基因BCR/ABLC末端肌动蛋白结合域(actin-bindingdomain，ABD）蛋白对白血病细胞增殖和凋亡的影响。方法构建含有ABD基因的重组表达载体，应用蛋白转导结构域（proteintransductiondomain，PTD）将蛋白转入白血病细胞内，应用Westernblot与免疫荧光法确定蛋白是否进入白血病细胞，然后分别应用流式细胞仪及MTT法检测融合蛋白对白血病细胞凋亡及增殖的影响。结果成功构建PTD-ABD融合表达载体，获得高纯度PTD-ABD融合蛋白。同时构建PTD表达载体并获得高纯度表达蛋白。将PTD、PTD-ABD蛋白与白血病细胞K562、HL60共培养，Westernblot与免疫荧光法确定PTD、PTD-ABD蛋白成功进入细胞内。与阴性对照比较，PTD-ABD蛋白能显著抑制HL60细胞的生长，并且对HL60细胞的凋亡具有明显的促进作用，差异具有统计学意义（P<0.05），但对K562细胞的增殖及凋亡无影响（P>0.05）；PTD蛋白对K562、HL60细胞的增殖及凋亡无影响，与阴性对照比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论PTD转导的ABD蛋白抑制HL60细胞的增殖，并诱导细胞凋亡。