鞘氨醇激酶2与蛋白激酶D参与调控丁酸钠诱导的人肝癌细胞凋亡

目的探讨蛋白激酶D（PKD）与鞘氨醇激酶2（SphK2）参与调控丁酸钠诱导的人肝癌HepG2细胞凋亡的分子机制。方法采用流式细胞仪检测不同浓度丁酸钠作用48h后人肝癌HepG2细胞的凋亡率，以及干扰或过表达PKD或SphK2对丁酸钠诱导人肝癌HepG2细胞凋亡率的影响；并且在分别干扰PKD或SphK2后以免疫印迹法检测其对丁酸钠诱导另一蛋白激活（磷酸化）的影响。结果丁酸钠能明显诱导HepG2细胞凋亡(P<0.01)，且具有浓度依赖性；而在PKD或SphK2被干扰后，丁酸钠诱导细胞凋亡率比未干扰细胞明显增高（P<0.01），而过表达PKD或SphK2的细胞在丁酸钠作用下其凋亡率比空质粒对照组细胞明显下降（P<0.01），并且干扰PKD可阻断丁酸钠诱导的SphK2激活(P<0.01)，而干扰SphK2则对PKD的激活无影响（P<0.01）。结论PKD和SphK2均可负性调控丁酸钠诱导的HepG2细胞凋亡。