人脐带间充质干细胞的新分离方法及其作为骨组织工程种子细胞的相关研究

目的探讨人脐带间充质干细胞（humanumbilicalcordmesenchymalstemcells，hUC-MSCs）的新分离方法及其作为骨组织工程（tissueengineeringbone，TEB）种子细胞的特点。方法处理脐带组织，将含有杂质较多的组织去除，使剩余组织尽可能为Wharton’sjelly。采用组织块培养皿（实验组）及普通培养皿（对照组）分别分离脐带间充质干细胞，统计组织块培养成功率及获取原代脐带间充质干细胞的数量。流式细胞仪检测3代细胞的表面分子，并进行成骨、成软骨、成脂诱导以鉴定其多向分化潜能。将获取的3代脐带间充质干细胞与DBM骨体外构建组织工程骨，并检测细胞与组织工程骨的黏附率，激光共聚焦及总蛋白检测来确定细胞在支架材料上的生长情况。结果实验组与对照组培养12d时组织块漂浮数为0vs13；培养成功率为（86.0±2.7）%vs（44±4）%，细胞数量为（24.7±3.6）×104vs（5.1±1.0）×104，2组相比差异均有统计学意义（P<0.01）。P3细胞阳性表达CD44+、CD73+、CD90+、CD105+，阴性表达CD34+、CD45+，具有向成骨、脂肪、软骨分化潜能。细胞在DBM上的黏附率为(81.3±4.7)%，相容性好，构建TEB上的种子细胞随时间增殖。结论新分离方法可以简化、规范操作过程，提高组织块的利用率，获取大量细胞（提高15~20倍）。细胞与DBM相容性好，可成功构建TEB。