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ISSN: 2333-9721
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腺病毒介导slit2基因转染人视网膜色素上皮细胞对RF/6A细胞迁移及管腔形成的影响

, PP. 1619-1623

Keywords: slit基因,脉络膜新生血管,脉络膜视网膜血管内皮细胞,迁移,管腔形成

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Abstract:

目的观察共培养模型下,腺病毒介导的slit2基因转染人视网膜色素上皮细胞(RPE)对猴脉络膜视网膜血管内皮细胞(RF/6A)迁移及管腔形成的影响。方法用腺病毒介导的slit2基因(Ad-slit2)转染RPE细胞,同时设空载体腺病毒转染组(Ad-null)及空白对照组。转染24h及48h后,采用RT-PCR及Westernblot法分别检测RPE细胞中slit2、VEGF的mRNA及蛋白表达情况;ELISA法检测RPE细胞培养基上清液中VEGF的分泌水平;建立RPE&RF/6A共培养模型,采用Transwell小室法及Matrigel胶体外三维成型法分别检测过表达slit2基因的RPE细胞对RF/6A细胞迁移能力及管腔形成能力的影响,并计算迁移数目及管腔形成长度、管腔数。结果Ad-slit2转染24、48h后,RPE细胞在基因及蛋白水平表达slit2、VEGF均有明显增高;ELISA结果显示过表达slit2基因的RPE细胞其培养基上清液中分泌型VEGF水平增高;在RPE&RF/6A共培养下,空白对照组、Ad-null转染24h组、Ad-slit2转染24h组、Ad-null转染48h组、Ad-slit2转染48h组中,RF/6A细胞迁移数目分别是(40.6±4.5)、(36.7±3.5)、(67.7±4.2)、(36.0±3.6)、(79.7±3.5);管腔形成长度分别是(3.95±0.31)、(4.53±0.26)、(6.04±0.34)、(4.09±0.18)、(7.27±0.45)mm,管腔数分别是(8.7±3.2)、(8.9±3.6)、(15.9±4.2)、(8.3±2.4)、(23.3±4.5)。Ad-slit2转染24h及48h组与空白对照组比较,差异具有统学意义(P<0.05)。结论腺病毒介导的slit2基因转染RPE细胞可促进RF/6A细胞的迁移及管腔形成。RPE细胞中的slit2可能参与脉络膜新生血管形成过程。

References

[1]  孙丽梅, 田连胜, 马红艳, 等. SLIT2在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义[J]. 中国组织化学与细胞化学杂志, 2012, 21(4): 377-380. [2]余祖滨, 白莉, 高磊, 等. 肺癌组织神经生长导向因子Slit2蛋白表达及其临床意义的研究[J]. 中华肿瘤防治杂志, 2008, 15(12): 901-904. [3]李霖, 卿国忠. Slit-Robo信号通路作用的研究进展[J]. 国际病理科学与临床杂志, 2013, 33(1): 72-77. [4]黄莉芸, 周希瑗. 腺病毒介导的slit2 shRNA对缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞中血管内皮生长因子表达的影响[J]. 中国生物制品学杂志, 2014, 27(3): 361-365, 371. [5]Nusslein-Volhard C, Wieschaus E, Kluding H. Mutations affecting the pattern of the larval cuticle in Drosophila melanogaster[J]. Roux’s Arch Dev Biol, 1984, 193(5): 267-282. [6]Wang B, Xiao Y, Ding B B, et al. Induction of tumor angiogenesis by Slit-Robo signaling and inhibition of cancer growth by blocking Robo activity[J]. Cancer Cell, 2003, 4(1): 19-29. [7]Wang L J, Zhao Y, Han B, et al. Targeting Slit-Roundabout signaling inhibits tumor angiogenesis in chemical-induced squamous cell carcinogenesis[J]. Cancer Sci, 2008, 99(3): 510-517. [8]Han X, Zhang M C. Potential anti-angiogenic role of Slit2 in corneal neovascularization[J]. Exp Eye Res, 2010, 90(6): 742-749. [9]Jones C A, London N R, Chen H, et al. Robo4 stabilizes the vascular network by inhibiting pathologic angiogenesis and endothelial hyperpermeability[J]. Nat Med, 2008, 14(4): 448-453. [10]罗旭?, 吴星伟, 顾青, 等. 复方血栓通对猴脉络膜-视网膜内皮细胞增生、移行和管腔形成的作用[J]. 中华眼视光学与视觉科学杂志, 2011, 13(4): 263-268. [11]Dong X, Wang Y S, Dou G R, et al. Influence of DII4 ?via? HIF-1α-VEGF signaling on the angiogenesis of choroidal neovascularization under hypoxia conditions[J]. PLoS One, 2011, 6(4): e18481. [12]Jin J, Yuan F, Shen M Q, et al. Vascular endothelial growth factor regulates primate choroid-retinal endothelial cell proliferation and tube formation through PI3K/Akt and MEK/ERK dependent signaling[J]. Mol Cell Biochem, 2013, 381(1/2): 267-272. ?

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