葫芦素E对人结肠癌细胞Caco-2增殖与迁移的影响及其作用机制

目的研究葫芦素E（CuE）对人结肠癌细胞Caco-2增殖与迁移的影响，并探讨CuE作用的分子机制。方法用0.001、0.01、0.1、1、10μmol/L的CuE分别处理培养的Caco-2细胞，CCK-8法检测细胞增殖能力，采用划痕实验及Transwell小室细胞跨膜实验检测细胞迁移能力，荧光法检测细胞F-actin与G-actin相对含量，激光共聚焦显微镜观察细胞骨架F-actin，Westernblot分别检测cofilin、p-cofilin、LIMK2及p-LIMK2蛋白表达。结果CCK-8法、划痕实验与Transwell跨膜实验显示：0.1、1、10μmol/L的CuE对Caco-2细胞的增殖与迁移均具有明显的抑制作用（P<0.05），并呈现出剂量与时间依赖性；荧光法表明0.1μmol/L的CuE能增加Caco-2细胞G-actin含量（P<0.05），引起F-actin/G-actin的动态平衡失调，并在0.1μmol/L的CuE处理1、2、6、12、24h后，对细胞骨架F-actin有明显的破坏作用，Westernblot检测显示，不同浓度CuE处理Caco-2细胞后，cofilin、p-cofilin及p-LIMK2的蛋白表达明显降低（P<0.05），而LIMK2表达与对照组比较无明显差异。结论CuE可能通过抑制LIMK/cofilin信号通路而损害细胞骨架actin，从而导致结肠癌Caco-2细胞的增殖与迁移受到抑制。