湖南产尖吻蝮蛇蛇毒出血毒素性质和溶液构象的研究

经sephadexG-75凝胶过滤、QAE-sephadexa-50和CM-sephadexC-25离子交换步骤，从湖南产尖吻蝮(Deinagkistrodonacutus)蛇毒中纯化出两个出血毒素，被命名为HaHT-1和HAHT-2。用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定呈单一的蛋白染色带。两个出血毒素的分子量相同，均为23.5kDa。等点聚焦电泳测定他们的等电点分别为5.6和5.2。HaHT-1和HaHT-2均具有较强的出血活性（MHD分别为0.5和0.8ug),都有酪蛋白水解活力，无精氨酸酯酶、胆碱酯酶和磷酯酶A2活力。用CD谱测定HaHT-1和HaHT-2的溶液构象，HaHT-1的α-螺旋、β-折叠和无规卷曲分别为36.9%、35.5%和27.6%，而HaHT-2的α-螺旋、β-折叠和无规卷曲分别为23.4%、31.3%和45.3%。pH的变化对他们构象有影响，在pH2-11范围内，酸性比碱性大，随着酸性和碱性的增加其α-螺旋减少，无规卷曲增加，β-折叠结构变化不大。