中华绒螯蟹卵巢差减cDNA文库的构建

应用抑制性差减杂交技术构建中华绒螯蟹卵巢两个发育时期的差减cDNA文库。正向差减杂交以Ⅲ期卵巢为试验方、Ⅱ期卵巢为驱动方，反向差减杂交以Ⅱ期卵巢为试验方、Ⅲ期卵巢为驱动方；将所获差减cDNA片段克隆入质粒表达载体，转化大肠杆菌JM109。最后获得的正、反向差减文库分别含863、360个重组子。PCR扩增鉴定正、反向差减cDNA文库的插入片段平均大小分别为360和160bp，表明所构建的差减文库适合进一步研究中华绒螯蟹卵巢发育相关基因。