斜带石斑鱼生长激素/催乳素家族基因cDNAs的分子克隆及其进化意义

从斜带石斑鱼垂体提取总RNA，再取其50ng合成SMARTcDNA。从所构建的垂体SMARTcDNA质粒文库中筛选到生长激素/催乳素基因家族的2个成员的全长cDNA片段：生长激素(GH)基因全长为938bp，编码204个氨基酸；催乳素基因(PRL)全长为1429bp，编码212个氨基酸。采用计算机软件Mega2和CLUSTALW1.64b对9种鱼的生长激素/催乳素基因家族的3个成员(GH、PRL和生长催乳素SL)的氨基酸序列进行系统分析，构建NJ分支系统树，对于序列中的插入/缺失位点则采用PairaiseDeletion，1000次自展(Bootstrap)分析计算各节点支持率。根据3个基因的氨基酸序列构建的系统树表明，石斑鱼与金头鲷、金鲈和牙鲆聚成一类，虹鳟与大马哈鱼聚成一类，鲫鱼与鲶鱼聚成一类，鳗鲡成另外一类。根据石斑鱼全长cDNA推断的氨基酸序列比较表明，SL相对GH和PRL有较高的保守性。石斑鱼的GH、PRL和SL的氨基酸同源性在24%—31%，但其C-端的氨基酸同源性较高，尤其是C-端的3个Cys是严格保守的。其中SL与GH的同源性(30.8%)高于与PRL的同源性(25.6%)，GH和PRL的同源性最低(24.1%)。