烙铁头蛇毒纤维蛋白原溶酶研究:Ⅰ.分离纯化及理化性质

通过DEAE-SephadexA-50，DEAE-SepharoseCL-6B，MonoQ（FPLC）三步离子交换柱层析，纯化得到一新的纤维蛋白原溶酶，在碱性聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上均呈单一的蛋白带。分子量为2600，等电点pl4.7；它是一个糖蛋白，含糖量6.4%，其中中性糖0.3%，已糖胺4.9%，唾液酸1.2%。烙铁头蛇毒纤维蛋白原溶酶TMVFg由187个氨基酸组成，含有较高的酸性氨基酸，此外甘氨酸含量也较高。TMVFg热稳定性强，而酸不稳定，在280nm处具有典型的蛋白吸收峰，在无离子水中紫外消光系数E0.1%/280nm=1.558。纯化的TMVFg具有较强的精氨酸酯酶活力，对苯甲酰-L-精氨酸乙酯（BAEE）的Km值为1.4×10[-3]M。TMVFg的活性受苯甲基丹磺酰氟（PMSF）抑制；乙二胺四乙酸（EDTA）对活性无影响。TMVFg不能使纤维蛋白原凝固，但能水解纤维蛋白原α、β链。纤溶实验表明TMVFg具有激活纤溶作用。纯化的烙铁头蛇毒纤维蛋白原溶酶对酪蛋白无作用，无出血活性，因而与凝血酶样酶、出血毒素及β-纤维蛋白原溶酶（OUYANGetal.，1977）明显不同。